影响表达的所需基因在大肠杆菌中的因素？浏览次数：904次标签：|提问时间:2009-4-28 17:30 |提问者：lys2126
因素会影响目标基因在大肠杆菌中表达？
推荐答案（1）外源基因拷贝数的
（2）外源基因的表达效率
①启动子强度
有效②核糖体结合位点性别
③SD序列和起始密码子ATG间距
④密码子的
⑶表达了产品的稳定性
（4）细胞代谢负荷
⑸工程菌培养条件
BR />
建立一个载体，目的基因表达在植物根系和根细胞外分泌。请注明步骤次数：842悬赏分：20 |解决问题
时间:2009-2-14 09:13 |提问者：370 629 225
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建立特定的外源基因的植物表达载体，并转移到受体植物，没有植物遗传转化的最终目标。理想的转基因植物通常需要高水平的表达的外源基因在一个特定的地点和一个特定的时间，人们期望的表型性状。然而，近二十年的发展历程中经常表达效率低，表达产物不稳定，甚至基因失活或沉默等不良现象，转基因植物外源基因在受体植物不能被投入实际应用。此外，转基因植物的安全性问题已经引起许多国家的关注，例如，转基因的花粉传播，抗生素选择标记基因可能使某些抗生素的临床没用。使这种高科技植物基因工程的出现，是在一个前所未有的时期困扰着上述问题。为了解决这些问题，在最近几年中，人们种植转基因技术，广泛的植物表达载体的探索和改进，改善和优化是最重要的内容之一，本文已取得的进展进行了综述。
外源基因表达水平的1启动子的选择和转化往往是不理想的重要原因，转基因植物。发起人确定的基因表达中发挥关键作用，因此，选择合适的植物启动子，以提高其活性，是首先要考虑的问题，提高外源基因的表达。
本植物表达载体中，广泛使用的启动子是组成型启动子，例如，大多数双子叶使用的CaMV35S启动子的转基因植物，单子叶植物的转基因植物是主要用于从玉米泛素启动子，和从水稻Actinl启动子。外源基因在转弯的控制下，这些组件中的表达的启动子，表达的转基因植物和所有发育阶段的所有部分。但是，表达的外源基因在受体植物持续和有效的，不仅造成浪费，往往还会引起植物的形态变化，影响植物的生长和发展。为了有效地发挥作用的植物，而在同一时间，以减少不利影响的厂房，特异表达启动子的外源基因的研究与应用越来越重视。业已发现，特定的启动子，包括器官特异性启动子，诱导特异性启动子。例如，种子特异性启动子，果实特异性的启动子，叶肉细胞特异性启动子，根特异性启动子的特异性启动子的损伤，化学诱导的特异性启动子的光诱导特异性启动子，热休克诱导特异性启动子。特异性启动子的克隆和为特定的外源基因在植物中的表达奠定了基础。例如，瑞士CIBA-GEIGY PR-IA启动子控制的转基因烟草中Bt毒蛋白基因表达，启动子水杨酸及其衍生物诱导喷酒很便宜，无污染的化学物质，诱导抗性基因表达的害虫再次发生本赛季，显然是一个非常有效的方法。
植物转基因研究中，往往不能达到满意的效果，尤其是在使用天然启动子特异性表达和诱导表达，表达水平大多不太理想。要改造现有的启动子构建复合启动，将是一个非常重要的途径。例如Ni等的转录激活区的章鱼碱合成酶基因的启动子和甘露碱合成酶基因启动子的化合物的启动子，GUS表达的结果示出：改造后的启动子活性比35S启动子的显着改善。吴瑞等人将操作诱导型PI-II基因启动子的水稻Actinl内含子的组合，一种新的表达的启动子活性增加了近10倍（专利）。在植物基因工程研究，这些人工形成的启动发挥了重要作用。
建设载体，以提高效率外源基因的翻译，通常是基因改造，主要考虑三个方面：
21提高翻译效率5'-3 ' - 非翻译序列
许多实验，已经发现，真核基因的5'-3'-非翻译序列（UTR）的基因的正常表达是非常必要的，该区域的情况下往往会导致的mRNA的稳定性和翻译水平的显着降低。例如，在126kDa蛋白基因的烟草花叶病毒（TMV）的翻译起始位点的上游由68bp核苷酸Ω元件，该元件提供了一个新的核糖体结合位点，使格斯基因翻译活动提高数十倍。有很多的载体外源基因的5'-端加Ω翻译增强子序列。 ingelbrecht告诉进行过研究的各种基因的3'-末端序列，并发现，章鱼碱合成酶基因的3'-末端的序列使NPTII基因的瞬时表达在超过20倍的增加。此外，的不同的基因的基因表达增强的效率，在对基因表达的促进效果的不同，例如，rbcS3'-末端序列的3'-端序列的查耳酮合成酶基因的3'-末端的60倍以上序列。
22优化起始密码子周边序列
虽然在生物圈中的起始密码子是常见的，但是，从不同生物来源的基因有其特殊的外部起始密码子序列。例如，植物起始密码子周围的序列的典型特征是AACCAUGC，动物的起始密码子周围的的序列CACCAUG原核生物与两者之间的差别较大。 Kozak的详细研究前的起始密码子的ATG相邻基地定向诱变，转录和翻译的影响，并总结出围绕ACCATGG在真核生物中，最有效的序列的转录和翻译起始密码子，特别是-3位A的词条效率是非常重要的。购买的序列的构建称为Kozak序列，被施加到该表达载体。例如，一种细菌几丁质酶基因，和原始的起始密码子周围的序列UUUAUGG，以ACCAUGG，8倍的烟草中的表达水平增加。因此，使用非植物来源的基因构建体的表达载体，应根据要变换的植物起始密码子周围的序列的特性。
23基因的编码区是为变换
如果外源基因是来自于原核生物，由于在这些基因在植物中的表达机制的差异的往往是非常低的表达水平，例如，来自苏云金芽孢杆菌野生型的杀虫蛋白质基因在植物中表达，是非常低的，研究发现原核基因和植物基因mRNA的稳定性的差异造成的，这是由于减少。孟山都公司Perlak人的前提下不改变的氨基酸序列的毒性蛋白，杀虫蛋白质的基因转化，植物优选的密码子选择，GC含量，和删除的影响mRNA的稳定性原始序列中的元素，结果中毒蛋白质在转基因植物中的表达增加了30到100倍的昆虫。
3
消除位置效应去除后的外源基因的受体植物，它往往是非常不同的表达水平在不同的转基因植物。这是主要的不同的插入位点的受体植物基因组中的外源基因的结果。这被称为“位置效应”。为了消除位置效应，外源基因是转录活性区域的植物基因组表达载体，在当前构建策略通常考虑到核基质结合区以及定点整合技术的应用能够集成。
核基质结合区（矩阵协会地区，MAR）是真核细胞的染色质核基质的特定部分相结合的DNA序列。一般MAR序列位于转录活性的DNA的环状结构和哉，其功能是使分裂的作用，从而使每一个转录单元从周围的染色质的影响，以保持相对的独立性的边界。该研究表明，在MAR放置在两侧含有MAR基因-MAR的结构的遗传转化到植物表达载体所需的基因构建，可以显著靶基因的表达水平的增加，减少目标基因之间的不同的转基因植物中的表达水平的差异，减少的效果的位置。例如，Allen等人研究的异源MAR（来自酵母）和同源MAR（来自烟草）Gus基因在烟草中的表达，发现，酵母MAR使能增加12倍的平均水平的转基因表达，烟草本身MAR使转基因表达平均水平增加了60倍。 MAR的鸡溶菌酶基因也可以起到同样的作用。
另一种可行的方法是使用定点整合技术，此技术的主要原理是，转化载体宿主的染色体，外源基因通过同源重组，定点整合染色体上特定DNA片段的同源性地区。实际操作中，当所述第一分离的染色体的转录的活性区域的DNA片段，然后构建了植物表达载体。同源重组在的微生物有针对性的整合已成为一项常规的基因操纵，已成功地在动物体内有针对性的整合外源基因在植物中的叶绿体表达载体，有针对性的外一体化的原子核变换方法还是很鲜有成功案例。
4构建叶绿体表达载体
往往是外源性的核转化为了克服基因的表达，由于不安全的性行为的问题，如核基因花粉散布的位置效应，在近几年才出现的低效率一种新的遗传转化技术 - 叶绿体转化是它的优势和发展前景，越来越多的认可和重视。到目前为止，已出版的5种继承叶绿体转化烟草，水稻，拟南芥，马铃薯和油菜（侯丙凯等），使得这种转换技术开始成为新的增长点，在植物基因工程。
已测由于各种植物叶绿体基因组序列的外源基因的定点整合到叶绿体基因组中同源重组机制奠定了基础，叶绿体表达载体当前的构建基本上都属于特定网站的整合载体。构建叶绿体表达载体基本上是一个指向例子载体。生成叶绿体表达载体一般外源基因的表达盒，每个连接期间叶绿体DNA序列的两侧，提到作为同源重组片段，或定位段（定向片段）。当载体导入到叶绿体中，由这两个片段具有相同的在叶绿体基因组中发生同源重组的片段，它是能够将外源基因整合到叶绿体基因组中的一个特定的地点。叶绿体转化在作物改良的目的，需要发生同源重组后，插入外源基因的叶绿体基因组的原始序列既不造成的损失，并且它不会破坏的功能的原始基因的插入点。为了满足这种要求，现有的工作被选择相邻的两个基因的同源重组的片段，如rbcL基因/ ACCD四16StrnV/rpsl2rps7 psbA基因/变异之，rps7/ndhB，。指定的外源基因的同源重组的发生后，插入在两个相邻的基因间隔区中，以确保基因的原始功能不受影响。最近，丹尼尔和其他用途的烟草叶绿体基因组中的tRNA和trnI同源重组片段，构建一个共同的载体（通用矢量）。在高等植物中，由于的的tRNA和trnI DNA序列是高度保守的，作者建议，这样的载体，可用于各种不同的植物叶绿体转化。如果这种载体的多功能性得到证实，那么这项工作无疑是构建一个新的，方便实用的叶绿体表达载体，提供了一个很好的主意。
外源基因的定点整合到叶绿体基因组中的表达往往由于叶绿体基因组拷贝数很高的，第一个例子中，麦克布莱德等人BT的cryIA（c）毒素基因导入烟草叶绿体Bt毒蛋白的高效率高达3％至5％的叶中总蛋白质的表达，而一个典型的核转化技术只能达到从0001％至06％。最近，哥打京那，到烟草的Bt Cry2Aa2的基因导入烟草叶绿体还发现，烟叶中的毒蛋白的表达，占2％至3％的可溶性蛋白质，高20至30倍，比核转化，转基因烟草不仅抗敏感的昆虫，并能杀死那些对昆虫有一个高电阻的。斯托布近日报道，人类生长激素基因导入烟草叶绿体中的表达水平高达7％的叶蛋白，原子核变换方法的300倍以上。这些实验充分叶绿体表达载体的建设和改造，是实现高层次的表达外源基因的重要途径。
5定位信号的应用程序
以上几个向量优化战略的主要目的是为了提高外源基因的转录和翻译的效率，然而，高水平表达外源蛋白是否可以稳定在植物细胞中，其他重要的问题，需要考虑到在植物遗传转化的量的积累。
最近的研究发现，如果一定的外源基因被连接上的信号序列中的正确定位，使外源蛋白质产生定向运输到细胞内的一个特定的站点，例如：叶绿体，内质网，液泡等，可以显着提高系统的稳定性和外源蛋白的积累。这是因为特定区域？某些外源蛋白质的内质网内的环境中提供了一个相对稳定的，有效地防止外源蛋白质的降解。例如，Wong等人拟南芥Rubisco大亚基转运肽序列连接到专门的杀虫蛋白的转基因烟草叶绿体中积累的杀虫蛋白基因之前，总的外源蛋白的积累比对照组提高10到20倍。最近，叶亮，宋王艳茹的rbcS亚基的转运肽序列连接前PHB合成基因，试图使基因产品，在转基因油菜种子的质的积累，从而增加了外源性蛋白质含量。 ，万德尔特和思腾内质网定位的连接，并发现，在转基因植物中的外源蛋白的内容已被显着改善的外源蛋白质基因的序列（四肽KDEL的编码序列）。显然，定位信号了积极的作用，促进蛋白质的积累，但相同的定位信号是否适用于所有的蛋白质需要进一步确定。
6内含子增强基因表达的内含子增强基因的表达，最初是由Callis等人发现转基因玉米，玉米乙醇脱氢酶基因（ADHL）的第一个内含子（内含子1）表达外源基因显着增强，其他内含子的基因（例如子上，intron9的）也有一定量的促进效果。后来，瓦西尔列夫，还发现了第一个内含子的玉米果糖合成酶基因CAT的表达水平增加10倍。第三个内含子，水稻肌动蛋白基因，也可使由26倍的报告基因的表达水平增加。日期内含子增强基因表达的机制尚不清楚，但一般认为可能是存在的内含子提高了处理的效率和mRNA的稳定性的mRNA。 Tanaka等人，一些研究表明，内含子对基因表达的增强作用主要发生在单子叶植物和双子叶植物中是不明显的。
由于内含子增强，麦克尔罗伊构建单子叶植物表达载体，特别是在保持在启动子下游的基因的基因表达的水稻肌动蛋白基因的第一内含子。同样，Christensen等人在所构建的载体玉米泛素的第一内含子的基因被置于启动子的下游，以提高在单子叶植物中的外源基因的表达。然而，研究指出，对基因表达的启动子强度，该信元类型，靶基因序列，等多种因素的影响取决于具体的内含子的作用，甚至有时依赖于载体中的内含子的位置。例如，玉米ADHL基因9置于Gus基因的5'末端，和表达的GUS基因的CaMV35S启动子的控制下，没有增强;时，内含子的3'端被放置在内含子gus基因，在相同的起始子的gus基因的表达水平的控制下，增加约3倍。内含子的基因表达的机制可能是非常复杂的，可以看出，内含子如何建立高效植物表达载体，是缺乏一个固定的模式，值得进一步研究。
多基因控制的政策
到目前为止，大多数是一个单一的外源基因导入受体植物遗传转化研究。但足够强大的，有时由于一个单一的基因的表达或一个单一的作用机制尚未获得理想的转基因植物。如果两个或更多到植物基因的协同效应，在同一时间，将得到更可取比单基因的转换结果。这种策略已经应用如抗病，抗虫，抗逆的转基因植物的培育。例如，根据抗昆虫基因的昆虫频谱和作用的不同的机制，可选的两个函数互补基因的载体的构建，并通过某种方式的两个抗虫基因导入植物去。王伟和其他外源凝集素基因和蛋白酶抑制剂基因同时转入到棉花已经包含双价抗虫性基因的转化植株。巴顿Bt杀虫蛋白基因和蝎毒素基因导入烟草的同时，大大提高了抗虫性和能力，以防止害虫产生抗药性（专利）。在抗病性强，蓝燕我们的实验室建设含β-1，3 - 葡聚糖酶双价基因和几丁质酶基因的植物表达载体，并导入油菜和棉花，结果表明，转基因植物产生了显着的抵抗。近日，丰刀茸，李保建23个抗真菌病基因和hpt基因甚至在载体上，无论是昆虫抗性基因和bar基因连接到另一个载体，利用基因枪一起引入水稻结果表明，70％的R的后代包含导入的外源基因（67），和导入的多个外源基因的基因组位点中的一者或两者被集成在的倾向。
一般常规的转换，它是不能够超过25KB的外源DNA片段导入植物细胞。功能相关的基因，如数量性状基因座在植物抗病基因，该基因簇的形式主要入。如果某些大于100KB的大片段DNA，如天然植物染色体基因簇或不相链中的一个系列的外源基因导入植物基因组中同一个点，它可能会出现由多基因控制。优良性状或产生广谱的抗虫性，抗病性，还可以得到一个完全新的代谢途径的受体细胞中，产生新的生物分子。此外，的基因簇的大片段或基因簇的同步插入也可以在一定程度上克服由转基因带来的位置效应，减少基因沉默等不良现象发生。近日，美国汉密尔顿和阿尔弗雷德开发出新一代的载体系统，克隆大DNA片段和的帮助下农杆菌介导的直接转化植株BIBAC和TAC。这两家运营商不仅要加快基因的图位克隆，同时也为多基因控制，品种改良将具有潜在的应用。目前，多基因转化中的应用研究才刚刚开始。论BIBAC和TAC载体
8选择标记基因使用和删除的
选择标记基因的遗传转化中可以转化的细胞（或个人）从大量的非转化细胞中筛选出的标记基因。它们通常可以使产生的转基因细胞，有选择剂的产品的电阻，所以，转基因的细胞在正常的生长介质中，添加这样的选择由于缺乏抵抗力的非转基因的细胞表现出此选择剂敏感性，而不是生长，发育和分化。载体中，构建，选择标记基因的连接侧，两者都具有自己的基因调控序列（如启动子，终止子等）的目的基因。选择标记基因，有两个主要的类别：抗生素抗性基因，除草剂抗性基因。前者可以产生抗生素抗性，后者可产生耐药性的除草剂。使用的抗生素抗性基因，包括NPTII基因（潮霉素抗性），和Gent的基因产生潮霉素磷酸转移酶，新霉素磷酸转移酶，卡那霉素抗性），HPT基因（产生（反庆大ADM）。除草剂抗性基因，包括EPSP基因（产生5 - 丙酮酸莽草酸-3 - 磷酸合成酶，草甘磷），GOX基因（草甘膦氧化酶降解草甘膦），bar基因（产生PPT乙酰转移酶，的反Bialaphos或草铵膦）。
以上这1，2，3，5，6，他们都可圈可点，尤其是因为您要到胞外分泌的的骨架载体可以选择PB I121，然后你可以在上面的基因型的变化。
背后是克隆步骤都相对简单。
1第一限制性酶切位点，以获得所需的基因，加上传入变化的一个很好的载体。
2质粒转化大肠杆菌DH5α扩增
放大良好的质粒转化植物细胞
4的收集根外介质检测蛋白的表达和分泌。是否
至于转型的载体几步简单说说就可以了回答后， ，如果我们真的做一个很好的载体，可以打开自己的公司。
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性格特点：路痴，逗比，中二病
性格：中二病，肢体语言丰富，偶尔有些逗比，无知无畏，敢爱敢恨。
矢量箭头可以将自身能量凝结成**箭头能量越多可以凝结出的越多面积越大（可以各种组合 ） 星座：天秤座
生日：10月10日
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食物：大包菜
血型：？
身高：115cm
体重：86斤
性格特点：暴躁，冲动
性格：性情暴躁，个性冲动无脑的行动派，基本听从维德的指挥。
虫皇让身体变的巨大，各项能力接近成虫形态。 星座：狮子座
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食物：大麦茶，Pizza
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几何体以各种特殊材质几何体进行攻击和防御 星座：？？？
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大罗神通棍大赛赐予的原力武装，可大可小，无坚不摧。通过原力催动，可以随意改变尺寸和质量。持有者的原力和力量足够强的话，理论上甚至能够通天贯地，破空碎星。反之若落入庸人之手，则只会是一根普通的棒子而已。
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性格：有着坚定的信念和强大的行动力。不喜欢牵连他人，独自背负着一切。
烈斩大赛赐予的原力武装，外形是一把类似柴刀的大刀，但格瑞本人却用的十分轻松。武器的能力是所见皆可斩。
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食物：草莓
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性格：外表看起来一板一眼，正经高冷如同冰山，其实内心燃烧着火一样的热情。
羽蛇大赛赐予的原力武装，是一把形状如同锯子一般的大剑。
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生日：6月26日
年龄：17
爱好：看恋爱小说
食物：饭团
血型：B型
身高：184CM
体重：1492斤
性格特点：轻佻、搞怪
性格：看似言行举止轻浮不羁，没什么烦恼的样子，但实际是那种喜欢深藏心事的人。
自体重组可以把自己的身体机械化武装，但是相比于火力强劲的远程武器，雷德更喜欢用刀刃等近战武器武装自己，从而跟对手近身厮杀。
星座：双子座
生日：6月15日
年龄：18
爱好：饲养动物
食物：蔬菜
血型：O型
身高：189CM
体重：148斤
性格特点：阴沉、冷漠
性格：貌似冷血无情，苦大仇深。但是，内心深处似乎还埋藏着柔软的部分。
星座：摩羯座
生日：1月7日
年龄：16
爱好：打架
食物：肉
血型：A型
身高：192CM
体重：1612斤
性格特点：狂躁、好战
性格：讨厌弱者，拒绝和平，绝不妥协，身体里仿佛燃烧着永不熄灭的战斗之魂，似乎只有在充斥着战斗与厮杀的修罗之路上才能感觉到自我的存在。 星座：天蝎座
生日：10月31日
年龄：17
爱好：捉弄佩利
食物：油炸食品
血型：O型
身高：179CM
体重：136斤
性格特点：贪婪、狡诈、阴险、虚伪、无良
性格：他是个天生的骗徒，与生俱来的恶棍，内心包藏着的是无比的贪婪，任何东西在他眼里如果不能占为己有，就会全力将其摧毁。即便是如此，可他的脸上却总是带着人畜无害的笑容，了解他的人都说：“这世上大概没有比他的微笑更虚伪的东西了。。。。。”
1、姓名:茜婷
生日:6月12日
星座:双子座️
元力:冰雪
2姓名:颖宝
生日:4月
星座:白羊座
元力:召唤
3。姓名:凯莉
生日:7月17日
星座:巨蟹座️
元力:新月刃
4姓名:格瑞
生日:1月13日
星座:白羊座
元力:烈斩
5姓名:玛丽
生日:12月5日
星座:摩羯座️
元力:天使之箭
6姓名:祖玛
生日:6月19
星座:双子座️
元力:召唤
7姓名:金
生日:7月23日
星座:巨蟹座
元力:矢量箭头
Zida CX-30一直是整个网络中的热点：
首先，这是马自达未来两年将在中国市场推出的最后一款新车。其次，CX-30的超高外观和傲慢的价格引起了许多用户的喜爱和憎恶。
马自达CX-30试驾的优缺点是什么？
1299-1719万，这个价格并不便宜。
自动变速箱的起价为139,900元人民币，与终端折扣后的紧凑型SUV Qashqai和CX-4几乎相同。中高配置甚至与奥迪Q2L等入门级豪华SUV相当。马自达“小而美丽”的价格大胆，人们不得不担心：马自达，为什么让年轻人为CX-30付款？
最近，在青岛测试了CX-30之后，天涯先生想说：
年轻人，忘了价格！您确实需要马自达CX-30。
140,000内唯一的20L自吸+ 6AT小型SUV
在当前的涡轮增压时代，排量为20L的自然吸气发动机已成为稀有产品。
简而言之，价格范围为140,000至170,000，德国的Tange，美国的所有涡轮增压器的Angkola系列，本田双子座使用15L自吸式降低价格，15T Earth dream高性能。涡轮增压器的优点直观可见：快速启动，快速加速，强劲的性能可以给年轻人带来一时的激情，但是当涉及到线性加速乐趣时，人与车辆之间的交流感便来自于动力体验。自我吸收的要点。
以这个价格，没有多少主流车型能够为您提供20L自吸功能：马自达CX-4，日产Qashqai，丰田Yize/C-HR和马自达CX-30。但是后者的不同之处在于它是一款配备6AT的小型SUV。
与车身长度超过44米，重量接近15吨的CX-4和Qashqai相比，CX-30拥有更轻的车身和紧凑的车身，更加灵活，轻巧，并具有更好的加速体验。它被匹配到相同的水平。唯一的6AT变速箱，就像李鲁班的国王和姜子牙一样，简直是丛林中的黄金搭档，并且比Yize/C-HR的自吸+ CVT组合更有趣。
从天涯军的试驾经验来看，无论CX-30是在青岛La山风景区附近转弯，还是在慢速城市道路上行驶，还是在胶州湾跨海大桥的平稳加速下，都足以达到同等水平。最好的SUV驾驶。
首先，CX-30具有与Onksera相同的精细油门调节功能。例如，当您快速而深入地踩油门时，CX-30将更主动，更快速地换挡。此设置经常在城市道路上加速和减速。否则，它可以避免在快速加速过程中遭受挫折。
马自达CX-30试驾的优缺点是什么？其次，依靠马自达独特的黑色技术GVC PLUS矢量加速系统，CX-30会无意间帮助您以更稳定的姿势进出。再加上较低的车身重心，良好的跟踪和适度的转向反馈，因此当全速行驶时，您不会感到慌乱和失重。只有驾驶CX-30才能上山，才能释放出最大的魅力。
当然，您不应该认为这是一款具有完整运动方向的小型SUV。 CX-30的蝴蝶形仿生非独立悬架可以有效地抑制通过减速带和坑洼时的弹跳。棒状过滤器后的路感相似，并且还保证了舒适性和安全性。
简而言之，在140,000辆中仅有的20L自吸+ 6AT小型SUV。驾驶品质适合于驾驶波浪并满足日常通勤的舒适需求。仅此一点是值得的！
小型合资SUV市场拥有最佳的内饰质感，没有
除了动态性能外，这种不可忽视的合资SUV的另一个方面是内饰。
目前，包括Binzhi/XR-V和Yize/C-HR在内的小型SUV几乎都集中在技术和研发三个主要部分上。为了严格控制成本，他们基本上放弃了内部纹理的改进。看一下宾志熟悉的本田内饰六年。 Yize具有创新性，但新安装的9英寸垂直大屏幕看起来像“多余的”设计。
马自达CX-30是一个例外。一方面，它采用简化布局的概念，减少了中控台大屏幕，按钮和空调插座的复杂布局，以减少“视觉噪音”，使驾驶员可以专注于驾驶；另一方面，大面积的精美软塑料材料，细腻的针脚和皮革触手可及，均创造了与这款合资车的豪华车媲美的质感和乘坐环境。
毫不夸张地说，在整个小型SUV市场中，CX-30的内饰纹理是同类产品中最好的，并且没有人能做到。对于年轻人而言，白天和黑夜一起生活的室内装饰有时比外观更重要。从这个角度来看，还值得购买CX-30。
面对价值，年轻人可以放弃空间
如果遇到一个容貌不错但性格开朗的女孩，另一个温柔贤惠却又中等的女孩，该如何选择？
如果是您的初恋，估计您会选择前者的可能性很高，而马自达CX-30就是这样的高价值SUV，但有一些缺点。
马自达CX-30试驾的优缺点是什么？在外观方面，第二代Soul Motion设计为CX-30提供了与众不同的设计。它用“形状”代替了过去的复杂线条，并在光影之间创造了优雅而灵活的腰围。与Yize的特立独行者和Binzhi的流行时尚相比，CX-30显然更符合年轻人对个性和趋势的定义。
但是驱动和存储空间是它的插槽。老实说，Tianya Jun对CX-30的空间性能早有期望。毕竟，它的轴距达到了2653mm，超过了Binzhi和Yize，并且其设计与Ankerra和CX-4 A柱进行了比较。它也取得了进步，但实际表现仍然非常“马自达”，与缤智相比，头部和腿部空间还存在一些差距。而且，前部存储空间的人性化设计不足，并且没有地方可以放置大型手机。
总结一下
如今，当涡轮增压蓬勃发展时，CX-30 20L自吸+ 6AT似乎已稀有且昂贵。它适合家庭使用，可以上山旅行和通勤，并满足您的全方位汽车需求；与同级别的主流竞争对手相比，它的内饰更加精致，美观和实用。
至于价格和空间上的缺陷，就像iPhone的电池寿命短和价格高一样，面对高外观和高性能，它就像是一片乌云。
没有到达
所有光荣与梦想
在昼夜辐射
我知道在这米**的宇际
生命的责任
就是把所有来自虚空的
都还给虚空
速度再快的脚步也追不上
熵的矢量
旋转只是掩饰失落的暗能量
我知道百万光年的眉目传情
并不是我的理想
我把光的手指触向远方
既使要我带上心灵的氦烙印
消耗我短暂的百亿年生命
我也愿意
生命的燃烧
在几十亿光年时间与空间的
绞错中 黯淡了大半的艳色
但我 还是没有到达
游 戏
这是一场
死亡游戏
我们穿越亿万光年的生命
来到这里 游戏界面清析
操作简单 旋转 下降
如此而已
游戏目标 死亡 喷射
死亡者 成为无比沉重的质量
喷射者 寻找下一个死亡站点
我们曾穿越玫瑰的星云
我们曾穿越黑暗的寂空
我们曾穿越年轻的燃烧
我们曾穿越残喘的星系
我们曾穿越一个又一个
智慧微生物构建的繁华
在穿越一个扭曲的时空之后
我们来到这个站点 1631@黑洞comyz
验证身份 高能粒子
签署合同 死亡无怨
PLAY
星际列车第五十一条
带上情人 这是不确定的
在必要的时侯 你们可以交换
列车公告这样写着
这是最后一条 第五十一条 唯一没有
“禁止”字眼的一条
这是AAAAA第一趟百万光年星际列车
免费乘坐 申请者如云如雨
只是前五十条的规定
让一半人裹足不前
而这最后一条 让列车的每一包间
刚好一对不确定的情侣
真的可以放弃那么多吗
我不知道 赤裸裸地踏上列车
这一趟单程 带我到达那JBS10786543961
会不会是另一个2046 还是2047
身边的美人也同我一样茫然
我们都有只是单身申请者 为了这最后一条
拼揍成甜蜜的情侣
或许 我们误解了列车公告
这第五十一条 其实是最人性的
或许所有的前五十条都是温馨的
在穿越了最初的兴奋之后
我们驶进了最低沉郁闷的时空
那重复的星球带给了我们寂寞的眼神
于是 有了第一代小孩
后来 又有了第二代小孩
在抱着我的小孙女笑哈哈中
我突然想起 扭头问我的美女
嗨 你 叫 什么名字
唱歌的流浪星球
歌唱 不是本能
是生命向往向上的欲望
她在高速旋转 不停流浪
在这片火红色的星云里
在没有被某颗恒星俘虏之前
她不停地飞翔 并且歌唱
虽然到处都是自组织的新星系
但她却是例外中的例外
因为没有哪颗铁质星球
能拥有不成为行星的命运
而她也不想成为彗星
仅仅为了一个渴望
在温暖和冰寒之间
延续几百万次的轮回
当然 幸运总是源于痛苦
她的自由
来自那次致命的撞击
一场势均力敌的较量
她的躯体里
仍存有对方濒死的尊严
她的生命中
也总因为回忆而痛楚
她用旋转产生的触手
抚过星云空寂中纷乱的粒子流
就像抚过琴弦
弹奏配乐的旋律
她用旋转的动能
与金属大气相互磨砺
就像振动声带
唱出奇妙的歌声
她那因为撞击
而塌陷了三分之一的躯体
就是最好的扩音腔
让歌声能超越速度 飞扬
她不接受邀请
从不为某一个星系停驻
只是一边流浪
一边高声地歌唱
为了宇宙
为了自已
为了痛楚
为了歌唱 而歌唱
上一首歌唱创造
这一首歌唱死亡
下一首 她打算歌唱爱情
那是她经过一个双子星系的灵感
手·冰封
这个星球只有一个智慧生物
他有着超强的能力 那就是冰封
用百万年的时光 冰封一座山脉
解冻 冰封 解冻 冰封
让冰川用极寒 割裂一座座山体
在解冻时 又用水带走森林的化石
就这样 一块块 一岭岭地
消耗山的高耸
直到成为高原 成为平原
成为洼地 成为海洋
或用千万年的时光 冰封整个汪洋
解冻 冰封 解冻 冰封
让所有水和水的子民们 冰存在死亡
看看轮回中 哪一种可以延续
而新的生命又有何不同
就这样 他兴趣盎然地度过亿万时光
一天 一艘来自外星球的飞船
降落在这个星球
两个渺小的智慧生物 牵着彼此的上肢
悠然地走下飞船 走上了他的冰川
于是 他就恼了
思想过去 冰就封了
没有等他解冻
渺小的生物开始脆落
一块一块 一块一块 一块一块
散了一地 如石块般的各寻姿态
只有那彼此牵着的上肢 没有分离
“啪” 的一声
落在冰原之上
一场战争（诗歌版）
题记：我们的生命，只是宇宙歌唱的一个音符——田甜
引 子
炫人的军装，漂亮的武器
这是一场美丽的战争
我们的军队是民主的力量
开拔，开拔，开拔
自由的武装在网络里横扫八方
在德莫克瑞克的金手指尖
生命舞蹈快乐如风的畅想
一、没有战争的战争游戏
“我们一起参加‘民主战争游戏’吧”
当爽朗的民主军军歌响彻街头的酒吧间
当吧女克莉莎不再托着盘子
而是穿着超炫的军装大声地请人喝酒
当招兵的宣传影像跳动在黑色金属的摇滚之中
田甜大姐焕发了青春的朝气眼神明洁如白云
既使二妹再三劝阻小妹也赶来一再阻拦
一句“我觉得快乐”让二人哑口无语
穿上游戏的军装田甜大姐一脸的阳光
美丽的锋芒盖过二妹直逼小妹的风采
一样的形体却有着截然不同各具神韵的印象
只有二妹的身份让她不得不黯然无光
“生命是一种歌唱
梦想加上努力才能完美演绎
死亡不能湮灭她存在与不存在后的所有印迹”
哲理深邃的语言出自向来呆木的思想
没有人知道这个游戏的制作者是谁
这个基于整个网络的游戏迄今不见敌军的模样
枪炮声只是响彻在训练和演习场
除了炫丽的兵器充足的军饷还有平等的文章
虚拟人们不再需要自然人和网络也能升级智慧
这让军队的人数有增无减日益庞大
虽然军人们最日常的工作除了派对就是堆砖
他们在占领地外堆起一圈圈豪华可笑的城墙
“发现敌军”是最逗笑的口令和暗语
每晚酒吧间里的干杯前总是一次次被含笑而语
而干杯后的笑声总能震碎平民的耳膜和笑容
和笑声们一起飞扬的还有那些冷兵器的炫异
但田甜大姐从来不屑这样的聚会和兵器
新兵训练营和模块枪炮才是她最爱的玩意
铁打的营盘流水的兵她却安营扎寨岿然不动
任凭调令一纸一纸她独自训练兀自不听
军队居然没有惩罚这名抗令的士兵
反而因为她训练的优异而一再嘉奖
直到她掌握了一切单兵武器打败所有的教官
才给她打开了光荣的升迁之门
军队的嘉奖和勋章像雪花一样飞舞
每次授奖大会就是一个大型的派对
唯有军阶和军衔是铁板一块
没有真才实学的人莫想有半点机会
列兵田甜大姐在升官前犹豫了很久
最终她拒绝了指挥学校令人羡慕的邀请
自愿成为一名作战型的士官
她没有加入神秘阻击手和威风机甲的行列
而是钻进了“单兵堡垒”防守在亚洲基地的总部
成为一柄能够“四面发火”的剑
二位妹妹也早已因为没有战争而放下悬吊的心
“真正死亡”的游戏规则事实上形同虚设
二、阴谋
“这是一场阴谋”
梨花找到田甜后的第一句话让田甜如坠云雾
原来民主军的防御工事是一种特殊数据
它们的屏蔽让百分之三十的虚拟世界不再可知
既使无所不知无所不在的网络也无法感受自已
这种黑暗正在向整个网络蔓延伸展
“这是一场真正的战争”
网络之神的军队正在秘密地成长
已经有十九名团体虚拟人莫名失踪
还有许多高级别智慧的虚拟人也不知去向
在那百分之三十的黑暗之中
虚拟虚拟人更是全部消亡
神之军队已经做好了开战的准备
但不知敌人真正的目的将无法取得最终的胜利
于是梨花找到田甜这稀有的双重身份的人
希望田甜出入民主军的势力窃取最高的机密
田甜没有拒绝也不能拒绝
虽然她的紫色还在低迷的痛楚中徘徊
她的智慧让她明白此事生死攸关
这是她的责任和义务也是她自身求生存的路径
还有她无法丢弃的大姐和二姐
她相信阴谋的揭露可以唤回敌军中的大姐
也是二姐得以存活的最好办法
突然间她想起二姐已经很久很久没有见面
愤怒和悲惊让田甜异常冷静
网谍的内在潜质使她没有方寸大乱
剥茧似的调查让她迷惑不解
所有线索只是显示二姐的失踪纯系她自愿而为
收获虽有却是关于民主军的内幕
一切矛头指向唯一的目标
人类，一个团结的人类在网络外策划了阴谋
“消灭不平等的三大阶级”是民主军的号角
有了作战的依据才有了成熟的战略
神之军队秘密运动到指定的地址
民主军的军人们还在狂欢
像是庆祝生日般庆祝他们的死亡
军队的高层早已知道神之军队的存在
也预计战争的爆发迫在眉睫
但他们只将精锐收缩在要塞
却没有将危险告知他们的下级军官和士兵
田甜再次获得了这个情报
神之军队迅速调整避短就长
网络上依旧是歌舞升平
普通的人们丝毫不知阴谋在重叠中生长
就连阴谋的两大制造者也在各自得意之时
全然不知另一个阴谋已潜入悄然
来自第三方的势力暗中聚集
借刀杀人隔岸观火趁火打劫的阴谋在静观
三、战争
战争
如暴风雨般淋灭了人们的欢乐
神之军队用亮丽的刺刀割断了人们游戏的心态
所有的死亡都那样的美丽
数据分散后的世界在舞蹈中炫彩异常
但痛楚从网络传到了现实世界
复仇的火焰如太阳般燃烧起来
神之军队收复着失地却失去着民心
但美丽的战争才刚刚开始
就在神之军队受阻于成型的数据堡垒前
一个告示和一支新的军队改变了一切
民主军故意让杂牌军送死的阴谋被揭露
而新的“革命军”以摧枯拉朽之势吞噬着地址
整个虚拟世界都陷入了战争
现实世界的人们也分裂成五派力量
观望者成了最大的势力从而默许了战争的延续
来自共产主义太空公司的势力无比强大
民主军借以抗拒神之军队的物殊堡垒对它无效
神之军队那无以伦比的战略战术也对它无力
战斗力非凡的革命军用坚强粉碎着一切
王霸之军有着超强的经济实力和最优秀的士兵
也有着最先进的数据科技和最出色的指挥军官
最终民主军与神之军队缔结盟约才抵挡住进攻
三方力量暂时处在了微妙的平衡之中
谁也不知道第四者是怎样来到战场
它的到来改变了一切让所有人跌破眼镜
强大的军队怪异的虚拟军人
如外星人登陆一样让人类目瞪口呆
没有势力自称对它负责
也没任何自然和虚拟人认识那个军队中的一员
它的口号是没有口号
它的进攻代表了一切
沉默的军队死神般收割着战场
盟军与革命军在危难中的自动互助抵抗着失败
战火从太空地址燃到地球地址
一场孕育着死亡的决战在民主军亚洲基地展开
盟军正式向革命军发出了求救呼吁
最精锐的盟军军队集结困守
革命军最强大的预备总队首次出动
现实世界的人们也都守护在这里不再争斗
沉默的军队依旧没有声明
集结的队伍如蝗虫般灾害着人们的眼睛
天空仿佛不再有太阳的存在
明月也只有黯然退隐
群星依旧闪烁
但人们发现那些是敌军的大型飞船
短暂的和平更加窒息着呼吸
于是大家宁愿盼望死亡早一点到来
四、歌唱
田甜作为联络官被派往革命军前敌指挥部
在这里她意外见到了她的二姐
如今的二姐一身戎装军衔闪闪
上将二姐竟然成了革命军最高级别的将领之一
此次作战她是前线最高指挥官
熠熠发光的神采使她超越了两个姐妹的风姿
少将参谋的小妹不得不先举手敬礼
而二姐的冷漠冲淡了久别重逢的喜悦和感叹
战役的开始平淡无奇
盟军的阵线在创伤后愈合
革命军的士兵坚定观望
看着死亡与光荣在网络里飞扬
沉默的军队试图攻击革命军的阵地
盟军坚定的反突击让他们欲动又止
一切在试探之后又归于沉寂
一切在试探之后又试探之后又归于沉寂
决战爆发在那样一个早晨
一只猫在房顶悠然地行走寻觅着阳光
一群鸟在树林中飞翔寻食露水般歌唱
一只鳄鱼爬上沼泽伸了伸脖子
一条鱼从鳄鱼尾巴边摆尾游走书写着涟漪文章
一个松果掉落在地上又滚下了山坡
一个姑娘涉水而汲黑发如云披散在潋艳波光
现实世界的炊烟袅袅依然
沉默的军队如闪电击落
惊雷跑马般向所有阵地开火
盟军的阵地瞬间失去三重
革命军更是连退几十里被切断了三军的联防
民主军和神之军队被彻底包围
革命军只能在外围搔痒般冲撞
而沉默的军队全力攻城无视革命军的进攻
一层层的防御工事在炮火下湮灭成永远的记忆
民主军的联络官面如土色
少将参谋田甜**无助地回望二姐
上将指挥官田甜二姐面色冷峻
没有什么能使她分心既使她知道小妹的目光
那是大姐的生死在剥离小妹的心
但没有什么能使她分心
因为在她手心掌握了三军的生死
一支隐秘的更强大的预备队只接受她的调遣
盟军终于在毁灭性的打击下回过神来
在最后的防线被攻破前
民主军强大的机甲部队用死亡赢得了时间
而神之军队用原本布置的几支伏兵挽住了颓势
两军又夺回了部分阵地重新布了三道防线
防守的主力则是最新一代的“单兵堡垒”
这是两军盟约后为防御革命军的秘密武器
不是到了最后时刻原本是不会用它
沉默的军队在“单兵堡垒”前止步
这些高低悬浮的堡垒将火力配置得威力无比
任凭敌军空地协同也无法再突破向前
只是革命军仍无法收回失地
民主军的联络官一改土色重新趾高气扬
言语中不敬之词毫无顾忌信口而出
令革命军其他将领怒目相向
唯有两位田甜不屑于言
在盟军主防御方向的“单兵堡垒”之中
有一个堡垒别具特色
它发出的枪炮声如乐团的演奏
一会儿是《命运》交响的磅砣恢宏
一会儿是《蓝色多瑙河》的荡气回肠
一会儿是《十面埋伏》的禀冷杀气
一会儿是重金属摇滚歇斯底里的苍凉
而每一个音符都伴随着敌军的每一个死亡
每一个在战场在能听到它的演奏的战友
每一个能纵观战局的指挥官
每一个在幕墙上观注战役的现实世界的人
都被深深吸引了
人们无法想像在这生存与死亡
在这马赛克飞扬旋转的修罗场
音乐竟然
能以这样的形式来宣扬她的主张
于是，许多“单兵堡垒”加入了它的演奏
于是，其它的防御工事也加入了它的演奏
这样，更多的防御工事加入了它的合奏
后来，无数的防御工事开始了各自的演奏
整个战场象是一个巨大的音乐会
虽然许多人并不知这是从何处而开始的
但那个堡垒却独自依然
用尽所有的单兵武器演奏出所有的乐曲
直到它演奏出一曲几乎没有人听过的歌曲
这令一直与它合奏的士兵们不得不停下来
一时间所有武器都不再开火
包括敌人也不明所以然而不敢进攻
这是一首有些忧伤又有些快乐的乐曲
普通、简单还有些模仿
几乎没有听过这首乐曲
只有三个人突然泪如泉涌
五、姐妹
上将田甜二姐知道这是一首叫〈姐妹〉的歌
因为她是这首歌的第一个听众
当她从监狱网里出来
大姐就在栅栏过轻轻地吟唱
以后她跟随大姐辗转到巴西
又吟唱着这首歌接出了小妹
也于此知道大姐在等她的年岁里
是怎样的艰辛而又是怎样坚定的吟唱
少将田甜小妹知道这是一首叫〈姐妹〉的歌
当她有些高兴又有些茫然地走出巴西的监狱网
两个姐姐衣着简陋神情呆板却在那冷风里吟唱
令她一下子痛哭流涕，顿感温暖
不必再考虑去去去去向何方
姐姐们就是她的家，家中有姐姐们的吟唱
既使随后的生活和流浪那样艰难
姐姐们总是呵护她直到她有人领养
少将田甜突然发现最聪明的自已才是最傻
被紫色领养后大姐那心不在焉的态度
现在的她可以肯定那绝不是大姐的真心
那只是为了掩饰分别的酸楚和痛苦
而大姐和二姐一次又一次被领养失败
也绝不是“别人瞧不上俺们”的理由
而是她们不舍自已的借口和苦心
她们是为了自已这个自认聪明的小妹啊
沉郁的紫色知道这是一首〈姐妹〉的歌
前些天田甜就经常对自已吟唱
紫色也知道这首歌是田甜三姐妹自已的歌
她由不得后悔当初为什么没有合并她们
也后悔田甜找不到二姐自已也没有帮助她
而是一味地沉郁在自已的痛苦之中
现在她只有乞求三姐妹都平安回来
因为 她觉得自已已是她们中的一员
一等士官田甜大姐此时心如平镜
当战友们与她一起合奏时
她突然想起了两个妹妹
虽然二妹很久没有来看她
于是她且枪炮声演奏了这一曲她们的〈姐妹〉
她知道她们能够听见
“我们的生命，只是宇宙歌唱的一个音符”
她在心里对着她们说
后来的传说很多
也有人刨问过田甜二姐和小妹
但她们都有没有说一句话
于是这曲子被子冠以几百个名字被填了许多词
最广为流行的是〈战友〉和〈士兵〉
其次是〈生命〉和〈爱〉
但是没有几个人知道
它是〈姐妹〉
六、没有结束的结束
当盟军最后的防线摇摇欲坠
当沉默的军队发动最后的强攻
当战场内外绝大多数人认为失败已成定局
上将田甜二姐坚定的一挥手
数支强大的革命军杀入战场
这远比革命军摆出的预备队强大数倍的预备队
将沉默的军队冲得支离破碎
就连主帅的营盘也被叩打多次险些被歼
兵败如山倒沉默的军队溃退几万里
革命军的旗帜在网络里飘扬
上将田甜的威名就像春风一样吹绿人们的心田
然而小妹却褪下军装坚决离去
她用自已的功名换取了身躯的自由
她无法忘记
大姐在生命的最后时刻演奏的“哆来咪”
她也无法忘记二姐那被定格于历史的一挥手
她知道作为将军二姐无可厚非
她明白作为将军不能顾念亲情而不顾战局
她也知道士兵们大多也有兄弟姐妹
她也明白战争就是要有人死才能有人生
她还知道革命军虽然包含了借刀杀人的意味
但她还明白革命军用了最大力量来扭转战役
但她在看见二姐一挥手后的神迹中
她知道大姐原本可以不死 的
她对民主军“平等”的论调大为赞同
她对网络对人类的蔑视也同样认可
她对革命军的共产制度颇为向往
她想她还是远离这一切
大姐是一个牺牲品
二姐也是一个牺牲品
虽然她们都有在历史上留下了荣光
但她却不想为这糊涂的世界填上自已的梦想
她没有看见二姐在战后的旷野痛哭而跪
她没有去认领大姐的遗物
她没有听见二姐在大姐的纪念碑前的吟唱
她只是在自已心里一遍又一遍吟唱着〈姐妹〉
她告诉自已
自已的退出不是逃避
为了所有的大姐
她想走出自已和人类的迷雾
七、后记
姐妹
是小溪里的浪花
投入大海中
没有你我她
姐妹
是天空中的雪花
融在太阳里
没有你我她
PS以上作者均为“星夜子”
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