wb蛋白样品弄混怎么区分

区分不了，除非有分子测定仪可以测定出分子质量和构成来确定哪种蛋白是哪种蛋白，否则的话只能重新做一份了，下次一定注意把WB蛋白的区别放置，当进行接触滤纸、凝胶和膜的操作时，应戴手套。手上的油脂会阻断转移，提蛋白一定要过硬，不能吝惜蛋白酶抑制剂，测定蛋白浓度一定要选好方法，最重要的，wb的成功最大程度的依赖于sds-page，最好有预染marker。

拓展内容：

有效的样品制备是影响WB可重复性的非常重要的因素。需考虑以下问题：

1、靶蛋白是可溶/不可溶蛋白，细胞质/膜蛋白？

2、溶解的蛋白或其翻译后修饰的维持是否需要添加额外的缓冲成分(例如洗涤剂、酶抑制剂)？

3、蛋白质定量的方法是什么，缓冲成分会干扰蛋白定量吗？BCA蛋白定量检测法是总蛋白质定量的常用方法，其蛋白间差异较考马斯染料法的更小，但与还原剂、螯合剂不兼容（兼容去垢剂）。

小分子量蛋白的转膜需要注意：

（1）高浓度的凝胶有利于小分子量蛋白的分离。一般在目的蛋白离凝胶前沿05-1cm时停止电泳，太靠近凝胶前沿易引起边缘效应。

（2）SDS阻止蛋白与膜的结合，小蛋白更是如此。因此电转液中可以不加SDS。

（3）保持甲醇浓度20%。

大分子量蛋白的转膜需要注意：

（1） 而甲醇易使SDS从蛋白上脱离，因此适当降低甲醇浓度至10%或更低，防止蛋白沉淀。

（2） 降低电转液中甲醇的含量，这样可以促进凝胶的膨胀，更易于大分子量蛋白的转出。

（3） 使用硝酸纤维素膜时，甲醇是必需的。如果是PVDF膜，甲醇可以不必加入电转液，但需要预先用甲醇活化。

吃蛋白粉可以给人补充营养，但是补多了不会容易长痘的，和长痘没有关系。蛋白粉可以补充人们的蛋白质，蛋白质是保证身体的健康最重要的成分了，参加了身体的功能，和提高人们的抵抗力，像是其他物质的转运和生成都是靠蛋白质的。像是我们平时长痘的话也就是因为经常熬夜，饮食不好，让自己的身体有一些危害的，让肝脏的有害成分太多。还有可能就是经常考虑问题，让自己的压力变大，而且自己的免疫力不好，经常吃一些油腻导致肝火上升所以才会有一些痘痘的，蛋白质里面都是一些蛋白质混合的成分，它的用途也就是用在人体缺乏的成分，蛋白粉就是为了补充营养，不能吃太多。它是可以影响我们肌肉的生长的，而且还已经参与了激素的生产，提高了自己的免疫功能，像是健身的人们一般都会吃一些蛋白粉来维持自己身体的肌肉蛋白粉，它的功效就是可以让肌肉增长的更快一些，像是减肥的人们和健身的人都是可以吃的。还可以提高人的免疫力，体质虚弱的人可以多吃一些蛋白粉，因为蛋白粉它可以代表鸡蛋来补充人的营养，像是人的每天需要的蛋白质有八个鸡蛋左右，大多数的人都是不能吃够的，所以才会喝一些蛋白粉来代替，还可以修复人们的坏死细胞，让细胞达到一定的活性来代替，人的运作还可以调节人的荷尔蒙的产生。其实我们吃的蛋白粉，它是不会长一些，青春痘或者是痘痘，吃蛋白粉它可以美容养颜，痘痘和蛋白粉是没有关系的，像是我们在长痘痘的时候，有可能就是因为自己的身体，有一些变化，蛋白粉他吃多了也会伤害自己的肾脏的，因为蛋白物质是通过尿液来排除，如果有太多的蛋白，就会增加人的肾脏功能，所以它就会影响人的身体青春痘，它和分泌有一定的关系的。

蛋白质变性分子量会变小

蛋白质变性（denaturation）:生物大分子的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象

我以SDS-PAGE电泳为例试着说明你的问题:

SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中,与SDS分子按比例结合,形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物,这种复合物由于结合大量的SDS,使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块,从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异,由于SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的,因此在进行电泳时,蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小

非变性凝胶里面没加变性剂非变性胶跑出来的蛋白能保持其活性一般用做功能试验,如EMSA由于没有变性剂的原因非变性胶电泳时除了与蛋白分子量有关也会受都电荷的影响,因此对蛋白等电点的确定和缓冲液的酸碱性有注意,有时需要倒转电泳时的正负极从跑的胶来看,变性胶会比较好看,带比较窄,非变性胶跑出来则比较粗糙

导致谷类蛋白质营养价值较低的主要原因是什么？展开

薛总爱叨叨

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在我国的膳食结构中，谷类占有突出的地位，是我国人民的主食。人体每天所需热能的60% ~ 70%来自谷物，所需蛋白质的50% ~ 70%由谷物及其制品提供。中国的主要粮食是小麦和大米，此外还有玉米、小米和高粱。因为谷物的种类和品种很多，所以谷物的营养成分并不完全相同。即使是同一个物种，同一个品种，也会因地域、气候条件、土壤条件、施肥、耕作方式、加工方法等不同而有不同的营养成分。谷物的营养特性1。丰富的碳水化合物含量谷物的碳水化合物含量超过70%，其主要形式是淀粉。

在烹饪过程中，淀粉在水中膨胀、分裂、糊化，使人体容易消化吸收。是人类最理想、最经济的热源。2蛋白质的生物价值低。蛋白质的含量通常在7%到16%之间。蛋白质的氨基酸组成比例与理想蛋白质相差甚远。赖氨酸普遍缺乏，亮氨酸往往过剩，导致蛋白质中氨基酸失衡，这是谷物蛋白营养价值低的主要原因。除了谷物蛋白赖氨酸缺乏、小麦蛋白苏氨酸缺乏、玉米蛋白色氨酸缺乏外，它们的生物学价值都比较低，小麦粉只有52，玉米60。

1泛素 ubiquitin 可以结合所有的蛋白质吗

答: 我觉的不是是一种存在于大多数真核细胞中的小蛋白。它的主要功能是标记需要分解掉的蛋白质，使其被水解。换句话说原核生物表达的蛋白就不一定会被E1 E2 E3这些泛素连接酶识别因此它们就不一定会和ubiquitin结合

2如果高温变性，和它 结合的蛋白会分离吗？

答:这个不会的,泛素和蛋白质是通过酶共价结合的

附:

泛素（英语:Ubiquitin）是一种存在于大多数真核细胞中的小蛋白。它的主要功能是标记需要分解掉的蛋白质，使其被水解。当附有泛素的蛋白质移动到桶状的蛋白酶的时候，蛋白酶就会将该蛋白质水解。泛素也可以标记跨膜蛋白，如受体，将其从细胞膜上除去。

泛素由76个氨基酸组成，分子量大约8500道尔顿。它在真核生物中具有高度保留性，人类和酵母的泛素有96%的相似性。

泛素标记一个蛋白有以下三个步骤：

泛素的活化：泛素甘氨酸端的羧基连接到泛素活化酶E1的巯基，这个步骤需要以ATP作为能量，最终形成一个泛素和泛素活化酶E1之间的硫酯键。

E1将活化后的泛素通过交酯化过程交给泛素结合酶E2。

泛素连接酶E3将结合E2的泛素连接到目标蛋白上，当蛋白上已经存在泛素的时候，结合了E2的泛素可以直接连接在其上而不通过E3。

最终，被标记的蛋白质被蛋白酶分解为较小的多肽、氨基酸以及可以重复使用的泛素。

2004年，阿龙·切哈诺沃、阿夫拉姆·赫什科、欧文·罗斯因发现了泛素调节的蛋白质降解过程而获得了诺贝尔化学奖。

蛋白质是人类生命不可或缺的一部分，其中会有一小部分的蛋白质会随着人体的体液循环经过肾脏的过滤作用和尿液一起排出体外，当人体的肾功能或其他身体机能出现异常时，尿液中的蛋白质含量就会随之增高，这就是我们常听医生提起的尿蛋白高，那么尿蛋白高是怎么回事？

尿蛋白阳性是什么意思

尿蛋白阳性即是尿蛋白增高，在医学上尿中的蛋白含量的数值有一个正常范围，这个正常范围是随机尿液中蛋白含量小于100mg/L，或24小时尿液中蛋白含量小于150mg。当尿检中尿蛋白高于上述这个数值时便是化验单上经常见到的尿蛋白阳性。

生理性因素

功能性尿蛋白也成生理性尿蛋白，这种尿蛋白增高并非病态，是由于剧烈运动、发热、高温、受寒、精神紧张等因素的影响使肾血管痉挛、充血，导致肾小球通透性增强引起的蛋白质流失于尿液中，称之为可逆性蛋白尿。

肾小球损伤因素

肾小球蛋白尿是由于肾小球受到感染、免疫、代谢、毒素等因素的损害，引起肾小球的毛细血管壁破坏，细胞膜通透性增加或电荷屏障作用受损引起血浆蛋白大量渗入原尿，超过肾小管重吸收能力所致的尿蛋白增高。常见于急性肾小球肾炎、慢性肾小球肾炎、隐匿性肾炎等。

肾小管损伤因素

肾小管性蛋白尿是由于炎症或中毒等因素引起近曲小管对小分子蛋白质的重吸收功能降低引起蛋白尿增高。引起肾小管损伤的疾病常见于肾盂肾炎、肾小管重金属中毒、药物中毒、肾小管性酸中毒、肾移植术后等。

组织性因素

组织性蛋尿是肾组织细胞产生的蛋白质、肾脏组织的炎症、组织破坏分解的蛋白质、手药物刺激后尿道组织分泌的蛋白质等进入尿液中形成的蛋白尿，均属于组织性蛋白尿。当这种组织性蛋白尿出现病变时候也会导致尿蛋白增高。这种组织性蛋白尿常见于恶性肿瘤、病毒感染。

溢出性蛋白尿

溢出性尿蛋白是指肾小球的滤过功能以及肾小管的重吸收功能均处于正常状态，而本身血液中的血浆蛋白异常增多，超出了肾小球的滤出和肾小管的重吸收能力，使得尿液中的蛋白尿的含量增高。这种溢出性蛋白尿常见于溶血性贫血、血红蛋白尿、多发性骨髓瘤等疾病。

奶粉中的乳清蛋白占总蛋白含量的90%以上。奶粉里的蛋白质由两种成分构成：乳清蛋白和酪蛋白。乳清蛋白分子小，容易吸收，酪蛋白分子大，吸收要慢一些。乳清蛋白的比例越高，就越容易消化吸收。适度水解奶粉。有的宝宝肠道不好，牛奶分子颗粒较大，吸收不了。宝宝吃了会便秘，长期会造成营养不良。有的甚至会出现过敏症状。所以医生会建议，给宝宝选择这一类奶粉。

通过专门的蛋白水解工艺，把高致敏性的，普通牛奶蛋白变成低致敏性的小分子蛋白，从而减少宝宝过敏的风险，它与普通牛奶配置的配方奶粉相比，营养成分相同，过敏原含量少，小分子奶粉也是，需要看品牌，看配方、看奶源和工艺。 例如圣元小分子奶粉，它粉质非常细腻，没有颗粒感。配方也没有不友好的成分，乳清蛋白含量高达90％以上，是最接近母初乳的一款奶粉。

小分子奶粉主要，是适度水解的牛奶和纯羊奶，蛋白质颗粒更小，宝宝更容易吸收。所有的食品，只有吸收好了才能帮助宝宝生长发育，才能增强抵抗力和提升免疫力，所以小分子奶粉，是相当不错的选择。我家孩子下生就喝的蒙牛有机奶粉，感觉孩子吸收的，挺好没有别的反应，现在六个月了，在准备让他喝一桶1段的，再给他换成2段，个人感觉1段的比2段的营养要高一些。

小分子的奶粉有羊奶，可能味道重了点，还有就是雅培，美赞臣，雀巢，还有惠氏的BabyNes的都是部分水解小分子的！不过好像只有BabyNes的口感和正常的奶粉是一样的！其他口感都不是很好！